利用CRISPR/Cas9技术编辑Badh2基因改良水稻优质恢复系QR79的香味

吴钱蓉, 吴娴, 姜雪, 王倩, 宫彦龙, 王忠妮, 朱速松, 宋莉

CRISPR/Cas9-Mediated Editing of the Badh2 Gene Improves Aroma in Elite Restorer Line QR79

Wu Qianrong, Wu Xian, Jiang Xue, Wang Qian, Gong Yanlong, Wang Zhongni, Zhu Susong, Song Li

表1 试验所用引物序列

Table 1 The primer sequences used in this test

引物名称Primer name 引物序列（5′-3′）Primer sequence 引物用途Purpose gR-F-T1 CAGCGGCAGCTCTTCGTCGCgttttagagctagaaat 载体构建 OsU6a-R-T1 GCGACGAAGAGCTGCCGCTGCggcagccaagccagca 载体构建 gR-F-T2 CAAGTACCTCCGCGCAATCGgttttagagctagaaat 载体构建 OsU6b-R-T2 CGATTGCGCGGAGGTACTTGCaacacaagcggcagc 载体构建 U-F CTCCGTTTTACCTGTGGAATCG 载体构建 gRNA-R CGGAGGAAAATTCCATCCAC 载体构建 Pps-R TTCAGAggtctcT accg ACTAGTATGGAATCGGCAGCAAAGG 载体构建 Pgs-L AGCGTGggtctcG ctcg ACGCGTATCCATCCACTCCAAGCTC 载体构建 SP-L GCGGTGTCATCTATGTTACTAG 菌落PCR检测 SP-R TGCAATAACTTCGTATAGGC 菌落PCR检测 Cas9-F AGATGATCGCCAAGTCCGAGC 转基因阳性株检测 Cas9-R CTTGATGATGAGGTCCTTCTTG 转基因阳性株检测 Badh2 -F TCCATCTCCGTATCTCTCAC Badh2基因扩增、测序 Badh2-R TATGGGGGGCTTATACCGAA Badh2基因扩增、测序 Badh2-RP-F TTATGGTCTGGCTGGTGCTGT Badh2基因的荧光定量PCR扩增 Badh2-RP-R TGCTTGACGCTTAGGTAGTTGT Badh2基因的荧光定量PCR扩增 Actin-RP GTACAGTGTCTGGATTGGAGGAT 水稻内参基因扩增 Actin-FP GGGTCCGAAGAATTAGAAGCA 水稻内参基因扩增