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• 遗传育种·种质资源·生物技术 • 上一篇    下一篇

工业大麻甲基磺酸乙酯(EMS)诱变体的筛选及RAPD分析

姜颖,孙宇峰,潘冬梅,李秋芝   

  1. 黑龙江省科学院大庆分院,163319,黑龙江大庆
  • 收稿日期:2017-07-26 修回日期:2017-09-13 出版日期:2017-12-15 发布日期:2018-08-26
  • 作者简介:姜颖,助理研究员,研究方向作物遗传育种
  • 基金资助:
    黑龙江省青年科学基金(QC2016037);黑龙江省科学院青年创新基金重点项目;黑龙江省科学院预研项目(YY2017DQ01)

EMS Mutant Screening and RAPD Analysis on Industrial Hemp (Cannabis sativa L.)

Jiang Ying,Sun Yufeng,Pan Dongmei,Li Qiuzhi   

  1. Daqing Branch of Heilongjiang Academy of Sciences,Daqing 163319,Heilongjiang,China
  • Received:2017-07-26 Revised:2017-09-13 Online:2017-12-15 Published:2018-08-26

摘要:

为了构建工业大麻EMS突变体库,为大麻功能基因组学研究准备基础材料,利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯溶液诱变处理火麻一号,对获得的M2代植株进行农艺性状及其他生物学性状的表型筛选,结果共获得37份苗期和成株期发生变异的突变体,其中27份苗期变异类型、10份成株期变异类型,变异率分别为20.93%、11.24%。对突变体进行了RAPD分析,26个引物中有11个引物扩增出多态性,证明突变体在基因上发生了变化,为EMS化学诱变突变群体在工业大麻功能基因组的研究和育种方向提供了理论和实践基础。

关键词: 工业大麻, 甲基磺酸乙酯, 突变体, RAPD

Abstract:

Mutant library is the basis of functional genomics research. In this study, seeds of hemp varieties Huoma No.1 were treated by chemical mutagen Ethyl sulfonate (EMS). Mutation plants were screened in M2 generation according to agronomic and biological traits. 37 mutants were acquired from seedling stage to adult stage. 27 mutants were found in seedling stage and 10 mutants were found in adult stage, correspondingly mutant percentages were 20.93% and 11.24%. Furthermore, mutants were screened by RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA), 11 out of 26 random primers could detect DNA polymorphism. Results showed the mutants varied not only on phenotypic changes, but also on the DNA level, which provided a theoretical and practical basis for the research of functional genomics and breeding direction in EMS mutation population of industrial hemp.

Key words: Industrial hemp (Cannabis sativa L.), EMS, Mutants, RAPD

表1

大麻RAPD分析适宜的引物及核苷酸序列(5′-3′)"

引物Primer 序列Sequence 引物Primer 序列Sequence
OPU-05 TTGGCGGCCT OPS-11 AGTCGGGTGG
OPU-12 TCACCAGCCA OPS-17 TGGGGACCAC
OPU-15 ACGGGCCAGT OPV-06 ACGCCCAGGT
OPX-13 ACGGGAGCAA OPV-08 GGACGGCGTT
OPX-17 GACACGGACC OPW-09 GTGACCGAGT
OPY-05 GGCTGCGACA OPW-16 CAGCCTACCA
OPY-11 AGACGATGGG OPZ-06 GTGCCGTTCA
OPY-15 AGTCGCCCTT OPZ-13 GACTAAGCCC
OPT-07 GGCAGGCTGT OPH-18 GAATCGGCCA
OPT-13 AGGACTGCCA OPI-07 CAGCGACAAG
OPP-12 AAGGGCGAGT OPR-08 CCCGTTGCCT
OPP-16 CCAAGCTGCC OPR-13 GGACGACAAG
OPP-17 TGACCCGCCT OPO-12 CAGTGCTGTG

图1

突变材料DNA提取"

图2

引物OPP-12扩增结果 M,D2000 DNA ladder;1,未诱变的火麻一号;2~9,诱变的火麻一号材料;下同"

图3

引物OPV-08扩增结果"

图4

引物OPY-11扩增结果"

图5

引物OPU-05扩增结果"

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