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作物杂志,2016, 第5期: 61–66 doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2016.05.011

• 遗传育种·种质资源·生物技术 • 上一篇    下一篇

盐稻8号遗传转化体系中不同抗生素种类与浓度的抑菌效果研究

王敬东1,马洪文1,樊云芳2,陈晓军1   

  1. 1 宁夏农业生物技术重点实验室,750002,宁夏银川
    2 国家枸杞工程技术研究中心,750002,宁夏银川
  • 收稿日期:2016-07-06 修回日期:2016-09-27 出版日期:2016-10-15 发布日期:2018-08-26
  • 通讯作者: 陈晓军
  • 作者简介:王敬东,副研究员,研究方向为植物生物技术育种
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(31460388)

The Study on Antibacterial Effects of Different Antibiotics and Concentrations in a Genetic Transformation System of Yandao8

Wang Jingdong1,Ma Hongwen1,Fan Yunfang2,Chen Xiaojun1   

  1. 1 The Key Lab of Agricultural Biotechnology of Ningxia,Yinchuan 750002,Ningxia,China
    2 National Wolfberry Engineering Research Center,Yinchuan 750002,Ningxia,China
  • Received:2016-07-06 Revised:2016-09-27 Online:2016-10-15 Published:2018-08-26
  • Contact: Xiaojun Chen

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摘要：

为建立粳稻遗传转化体系,筛选抗性愈伤组织,提高转化植株再生能力,选用羧苄青霉素钠（carbenicillin sodium,Car）、头孢噻肟钠（cefotaxime sodium,Cef）两种抑菌剂和一种标记选择剂潮霉素B（cygromycinB,HyB）,分别设4个抗生素浓度处理侵染转化共培养后的粳稻盐稻8号成熟胚愈伤组织。结果表明：Car的抑菌作用强于Cef,Car浓度为500mg/L时抑菌率达到100.0%,抗性愈伤组织的分化率达到42.2%;选择剂HyB浓度为30mg/L可获得86.1%较高质量的抗性愈伤组织,抗性愈伤组织的分化率达到39.5%。结论在以盐稻8号为受体材料的粳稻遗传转化体系中,抗生素的最佳搭配是500mg/L Car+30mg/L HyB。

关键词: 转化体系, 抗性愈伤组织, 转化植株, 抑菌剂, 选择剂, 盐稻8号

Abstract:

In order to establish a genetic transformation system in japonica rice, and to select the anti-callus and improve the regeneration ability in transgenic plant, two bacteriostatic agent (Carbenicillin sodium and Cefotaxime sodium ) and a selected marker (Hygromycin B) were used to optimize the culture conditions. The infected co-cultured callus was treated with 4 concentrations of each bacteriostatic agent. The results showed that the bacteriostatic activity of Carbenicillin sodium was better than that of Cefotaxime sodium. The bacteriostatic rate reached 100.0% and callus differentiation rate reached 42.2%, when the concentration of Carbenicillin sodium was 500mg/L. Meanwhile, 86.1% high quality of anti-callus was obtained and callus differentiation rate reached 39.5%, when the concentration of Hygromycin B was 30mg/L. The optimum culture condition was 500mg/L Car+30mg/L HyB in the genetic transformation system of Yandao 8, a japonica cultivar.

Key words: Transformation system, Anti-callus, Transgenic plant, Bacteriostatic agent, Selective agent, Yandao 8

表1

两种抑菌剂对农杆菌的抑制作用及对愈伤组织分化的影响"

抗生素浓度(mg/L)
Antibiotic concentration		 总愈伤数
Callus number		 未污染数
Unpolluted number		 抑菌率(%)
Bacteriostatic rate		 分化愈伤数
Callus differentiation number		 分化率(%)
Differentiation rate
羧苄青霉素钠 300 50 7.3Cc 14.1Cc 0Dd 0Dd
(Car) 400 50 29.2Bb 58.1Bb 8Bb 27.5Bb
500 50 50.0Aa 100.0Aa 21Aa 42.2Aa
600 50 50.0Aa 100.0Aa 6Cc 12.3Cc
头孢噻肟钠 300 50 1.0Dd 2.3Dd 0Bb 0Bb
(Cef) 400 50 8.0Cc 16.1Cc 0Bb 0Bb
500 50 17.0Bb 34.0Bb 2Aa 11.7Aa
600 50 33.0Aa 66.2Aa 0Bb 0Bb

表2

不同浓度的选择剂对抗性愈伤组织的筛选率及分化的影响"

HyB浓度(mg/L)
HyB concentration		 总愈伤块数
Callus number		 抗性愈伤数
Resistant callus number		 筛选率(%)
Screening rate		 分化愈伤数
Callus differentiation number		 分化率(%)
Differentiation rate
MMD21 20 50 46.8Aa 93.6Aa 22Aa 46.8Aa
30 50 43.0Bb 86.1Bb 17Bb 39.5Bb
40 50 16.6Cc 33.9Cc 4Cc 17.6Cc
50 50 0Dd 0Dd 0Dd 0Dd
MMD34 20 50 37.8Aa 75.5Ab 14Aa 36.8Aa
30 50 38.6Aa 77.5Aa 12Ab 30.8Bb
40 50 12.0Bb 24.0Bc 2Bc 16.7Cc
50 50 0Cc 0Cd 0Cd 0Dd
MMD43 20 50 44.7Aa 89.5Aa 22Aa 44.4Aa
30 50 40.0Bb 79.9Bb 11Bb 27.5Bb
40 50 9.2Cc 18.4Cc 1Cc 11.1Cc
50 50 0Dd 0Dd 0Cc 0Dd
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