盐稻8号遗传转化体系中不同抗生素种类与浓度的抑菌效果研究

doi:10.16035/j.issn.1001-7283.2016.05.011

作物杂志,2016, 第5期: 61–66 doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2016.05.011

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盐稻8号遗传转化体系中不同抗生素种类与浓度的抑菌效果研究

王敬东¹,马洪文¹,樊云芳²,陈晓军¹

1 宁夏农业生物技术重点实验室,750002,宁夏银川
2 国家枸杞工程技术研究中心,750002,宁夏银川

收稿日期:2016-07-06 修回日期:2016-09-27 出版日期:2016-10-15 发布日期:2018-08-26
通讯作者: 陈晓军
作者简介:王敬东,副研究员,研究方向为植物生物技术育种
基金资助:
国家自然科学基金(31460388)

The Study on Antibacterial Effects of Different Antibiotics and Concentrations in a Genetic Transformation System of Yandao8

Wang Jingdong¹,Ma Hongwen¹,Fan Yunfang²,Chen Xiaojun¹

1 The Key Lab of Agricultural Biotechnology of Ningxia,Yinchuan 750002,Ningxia,China
2 National Wolfberry Engineering Research Center,Yinchuan 750002,Ningxia,China

Received:2016-07-06 Revised:2016-09-27 Online:2016-10-15 Published:2018-08-26
Contact: Xiaojun Chen

摘要/Abstract

摘要：

为建立粳稻遗传转化体系,筛选抗性愈伤组织,提高转化植株再生能力,选用羧苄青霉素钠（carbenicillin sodium,Car）、头孢噻肟钠（cefotaxime sodium,Cef）两种抑菌剂和一种标记选择剂潮霉素B（cygromycinB,HyB）,分别设4个抗生素浓度处理侵染转化共培养后的粳稻盐稻8号成熟胚愈伤组织。结果表明：Car的抑菌作用强于Cef,Car浓度为500mg/L时抑菌率达到100.0%,抗性愈伤组织的分化率达到42.2%;选择剂HyB浓度为30mg/L可获得86.1%较高质量的抗性愈伤组织,抗性愈伤组织的分化率达到39.5%。结论在以盐稻8号为受体材料的粳稻遗传转化体系中,抗生素的最佳搭配是500mg/L Car+30mg/L HyB。

关键词: 转化体系, 抗性愈伤组织, 转化植株, 抑菌剂, 选择剂, 盐稻8号

Abstract:

In order to establish a genetic transformation system in japonica rice, and to select the anti-callus and improve the regeneration ability in transgenic plant, two bacteriostatic agent (Carbenicillin sodium and Cefotaxime sodium ) and a selected marker (Hygromycin B) were used to optimize the culture conditions. The infected co-cultured callus was treated with 4 concentrations of each bacteriostatic agent. The results showed that the bacteriostatic activity of Carbenicillin sodium was better than that of Cefotaxime sodium. The bacteriostatic rate reached 100.0% and callus differentiation rate reached 42.2%, when the concentration of Carbenicillin sodium was 500mg/L. Meanwhile, 86.1% high quality of anti-callus was obtained and callus differentiation rate reached 39.5%, when the concentration of Hygromycin B was 30mg/L. The optimum culture condition was 500mg/L Car+30mg/L HyB in the genetic transformation system of Yandao 8, a japonica cultivar.

Key words: Transformation system, Anti-callus, Transgenic plant, Bacteriostatic agent, Selective agent, Yandao 8

王敬东,马洪文,樊云芳,陈晓军. 盐稻8号遗传转化体系中不同抗生素种类与浓度的抑菌效果研究[J]. 作物杂志, 2016 (5): 61–66

Jingdong Wang,Hongwen Ma,Yunfang Fan,Xiaojun Chen. The Study on Antibacterial Effects of Different Antibiotics and Concentrations in a Genetic Transformation System of Yandao8[J]. Crops, 2016(5): 61–66

图/表 2

表1

表2

参考文献 22

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	抗生素浓度(mg/L) Antibiotic concentration	总愈伤数 Callus number	未污染数 Unpolluted number	抑菌率(%) Bacteriostatic rate	分化愈伤数 Callus differentiation number	分化率(%) Differentiation rate
羧苄青霉素钠	300	50	7.3Cc	14.1Cc	0Dd	0Dd
(Car)	400	50	29.2Bb	58.1Bb	8Bb	27.5Bb
	500	50	50.0Aa	100.0Aa	21Aa	42.2Aa
	600	50	50.0Aa	100.0Aa	6Cc	12.3Cc
头孢噻肟钠	300	50	1.0Dd	2.3Dd	0Bb	0Bb
(Cef)	400	50	8.0Cc	16.1Cc	0Bb	0Bb
	500	50	17.0Bb	34.0Bb	2Aa	11.7Aa
	600	50	33.0Aa	66.2Aa	0Bb	0Bb

	HyB浓度(mg/L) HyB concentration	总愈伤块数 Callus number	抗性愈伤数 Resistant callus number	筛选率(%) Screening rate	分化愈伤数 Callus differentiation number	分化率(%) Differentiation rate
MMD21	20	50	46.8Aa	93.6Aa	22Aa	46.8Aa
	30	50	43.0Bb	86.1Bb	17Bb	39.5Bb
	40	50	16.6Cc	33.9Cc	4Cc	17.6Cc
	50	50	0Dd	0Dd	0Dd	0Dd
MMD34	20	50	37.8Aa	75.5Ab	14Aa	36.8Aa
	30	50	38.6Aa	77.5Aa	12Ab	30.8Bb
	40	50	12.0Bb	24.0Bc	2Bc	16.7Cc
	50	50	0Cc	0Cd	0Cd	0Dd
MMD43	20	50	44.7Aa	89.5Aa	22Aa	44.4Aa
	30	50	40.0Bb	79.9Bb	11Bb	27.5Bb
	40	50	9.2Cc	18.4Cc	1Cc	11.1Cc
	50	50	0Dd	0Dd	0Cc	0Dd

盐稻8号遗传转化体系中不同抗生素种类与浓度的抑菌效果研究

The Study on Antibacterial Effects of Different Antibiotics and Concentrations in a Genetic Transformation System of Yandao8

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