检索
E-mail
RSS
高级检索 图表检索

当期目录 我要投稿 过刊浏览
高级检索 图表检索

作物杂志,2023, 第6期: 252–256 doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2023.06.034

• 植物保护 • 上一篇    下一篇

银川、徐州和赤峰地区番茄病毒病种类的鉴定

温智浩1(), 张胜丰2, 谢学文1, 柴阿丽1, 李建设3, 李磊1, 范腾飞1, 石延霞1(), 李宝聚1()   

  1. 1中国农业科学院蔬菜花卉研究所蔬菜生物育种全国重点实验室，100081，北京
    2徐州市贾汪区泰瑞农业科技有限公司，221133，江苏徐州
    3宁夏大学，750021，宁夏银川
  • 收稿日期:2022-05-12 修回日期:2023-09-15 出版日期:2023-12-15 发布日期:2023-12-15
  • 通讯作者: 李宝聚，主要从事蔬菜病害综合防治研究，E-mail：libaojuivf@163.com；石延霞为共同通信作者，主要从事蔬菜病害综合防治研究，E-mail：shiyanxia@caas.cn
  • 作者简介:温智浩，主要从事蔬菜病害综合防治研究，E-mail：985626903@qq.com
  • 基金资助:
    国家现代农业产业技术体系(CARS-23);宁夏回族自治区重点研发计划项目(2020BBF02025);中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-IVFCAAS)

Identification of Tomato Virus Diseases in Yinchuan, Xuzhou and Chifeng

Wen Zhihao1(), Zhang Shengfeng2, Xie Xuewen1, Chai Ali1, Li Jianshe3, Li Lei1, Fan Tengfei1, Shi Yanxia1(), Li Baoju1()   

  1. 1State Key Laboratory of Vegetable Biobreeding, Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
    2Xuzhou Jiawang Tairui Agricultural Science and Technology Co., Ltd., Xuzhou 221133, Jiangsu, China
    3Ningxia University, Yinchuan 750021, Ningxia, China
  • Received:2022-05-12 Revised:2023-09-15 Online:2023-12-15 Published:2023-12-15

RichHTML

1

PDF (PC)

141

摘要：

对2021年发生在银川、徐州、赤峰的番茄叶片出现黄绿相间的斑驳、叶片皱缩卷曲、植株矮化等疑似番茄病毒病的症状进行了鉴定。利用12种番茄病毒病的特异性引物进行RT-PCR检测，发现所检测的不同地区样品中，侵染番茄最多的病毒为黄瓜花叶病毒（CMV），检出率为60.00%，其次是番茄斑萎病毒（TSWV），检出率为46.67%。通过核苷酸序列比对发现，检测出的这2种病毒与CMV（AJ131619.1）和TSWV（MK318839.1）同源性最高，相似度分别为97%和99%。同时，基于CMV和TSWV基因序列构建系统发育树表明，宁夏银川地区番茄病毒样本为CMV和TSWV复合侵染。

关键词: 番茄, 黄瓜花叶病毒, 番茄斑萎病毒, RT-PCR

Abstract:

Tomato plants were identified for the symptoms of suspected tomato virus disease in Yinchuan, Xuzhou and Chifeng in 2021, such as yellow and green mottling, leaf shrinkage and curling, plant dwarfing. The specific primers of 12 tomato virus diseases were used for RT-PCR detection. The results showed that, the virus infecting tomatoes most was cucumber mosaic virus (CMV), with a detection rate of 60.00%, followed by tomato spotted wilt virus (TSWV), with a detection rate of 46.67%. Nucleotide sequence analysis showed 97% and 99% similarity with that of CMV (AJ131619.1) and TSWV (MK318839.1). Phylogenetic trees were constructed with partial gene sequences of CMV and TSWV, respectively. The results showed that tomato plants were co-infected by CMV and TSWV in Yinchuan region.

Key words: Tomato, Cucumber mosaic virus, Tomato spotted wilt virus, RT-PCR

表1

样品信息

样品编号
Sample number		 采集日期
Sampling date		 采集地点
Sampling site
FQ2021032101~FQ20210321017 2021-03-21 宁夏银川
FQ2021032501~FQ2021032506 2021-03-25 江苏徐州
FQ2021032801~FQ2021032807 2021-03-28 内蒙古赤峰

图1

疑似番茄病毒病植株症状的表现

表2

本研究中所用到的引物

病毒Virus 引物Primer 引物序列Primer sequence PCR产物 PCR product (bp) 参考文献Reference
CMV CMV-F 5′- CTTTGTAGGGAGTGAACGCTG -3′ 248 [8]
CMV-R 5′- AGATGGCGGCAACGGATA -3′
ToMV ToMV-1 5′-ATGTCTTACTCAATCACTTC-3′ 480 [9]
ToMV-2 5′-TTAAGATGCAGGTGCAGAGG-3′
PVX PVX-1 5′-AGTGGTATGGAACTGGATG-3′ 308 [10]
PVX-2 5′-TTATGGTGGTGGTAGAGTGA-3′
PVY PVY-F 5′-GCTCTAGAAGTTTGGGTTATGATGGATGGGGATG-3′ 420 [11]
PVY-R 5′ -CGGAATTCAATCACCCTGCCACCTCTATC-3′
BBWV R2F-F 5′- TTGAACCCGGAAAAAGGGAGTGTG-3′ 1300 [12]
R2F-R 5′- TTGCTAGGYCCAGGYAAATTGTA-3′
TYLCV TYLCV-1 5′-TAATCATTTCCACGCCCGTCTCG-3′ 648 [13]
TYLCV-2 5′-GGTTCTCATACTTGGCTGCCTCCT-3′
TMV TMV-1 5′-CTGTTTAGCCGGTTTGGT-3′ 470 [14]
TMV-2 5′-TCCCTTTACGGACATCAC-3′
ToCV ToCV-F 5′-GGTTTGGATTTTGGTACTACATTCAGT-3′ 450 [14]
ToCV-R 5′-AAACTGCCTGCATGAAAAGTCTC-3′
TSWV TSWV-1 5′-AACCCCGAACATTTCATAGA-3′ 425 [15]
TSWV-2 5′-TCAGACAGGATTGGAGCCAC-3′
TICV TICV-CF 5′-AATCGGTAGTGACACGAGTAGCATC-3′ 416 [16]
TICV-CR 5′-CTTCAAACATCCTCCATCTGCC-3′
ToMMV CP-F 5′-ATGTCTTACGCTATTACTTCTCCG -3′ 480 [17]
CP-R 5′- TTAGGACGCTGGCGCAGAAG-3′
ToBRFV ToBRFV dF 5′-GCAATGATCAATCCTGTATCTAAGCCATT-3′ 255 [18]
ToBRFV dR 5′-CATCACTACGGTGTAATACTTCAATGTTT -3′

图2

银川地区番茄病毒病样本中不同引物PCR的扩增结果 M：BM5000；N：阴性对照（ddH2O）；1：CMV；2：TSWV；3：PVX；4：PVY；5：ToMV；6：BBWV；7：TYLCV；8：TMV；9：ToCV；10：番茄传染性褪绿病毒（TICV）；11：ToMMV；12：番茄褐色皱纹果病毒（ToBRFV）

表3

银川、徐州、赤峰地区番茄病毒病种类及分布

采样地
Sampling site		 样品数
Sample number		 检出病毒种类及数量The type and number of viruses detected 病毒检出率
Detection rate
of virus (%)
CMV ToMV TSWV PVY、PVX、BBWV、TYLCV、TMV、
ToCV、TICV、ToMMV、ToBRFV
银川Yinchuan 17 15 0 13 0 88.2
徐州Xuzhou 6 2 0 1 0 33.3
赤峰Chifeng 7 1 2 0 0 28.6
病毒检出率Detection rate (%) 60.00 6.67 46.67 0

图3

基于TSWV和CMV基因组部分核酸序列的系统进化树

[1] 周杰, 夏晓剑, 胡璋健, 等. “十三五”我国设施蔬菜生产和科技进展及其展望. 中国蔬菜, 2021(10):20-34.
[2] 王秀芝, 史晓斌, 崔聪聪, 等. 嗜硫小红卵菌与噻虫嗪组合对番茄病毒病的预防和防控效果. 中国蔬菜, 2022(2):82-87.
[3] 程林发, 董文浩, 张凤桐, 等. 马铃薯Y病毒HC-Pro第182位赖氨酸残基参与引起烟草叶脉坏死. 植物病理学报, 2021, 51(1):41-48.
[4] 廖锦钰, 黄莉萍, 张战泓, 等. 番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染对番茄褪绿病毒传播的影响. 植物保护, 2021, 47(3):89-95.
[5] 杨菲, 张爱红, 王秀芝, 等. 内蒙古赤峰地区番茄斑萎病毒的鉴定. 园艺学报, 2021, 48(6):1208-1216.
doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2020-0750
[6] 吴贺, 荆诗韵, 刘丹, 等. 苏南五地(市)主要蔬菜作物的病毒种类、区域分布和发生趋势. 植物病理学报, 2021, 51(3):325-333.
[7] 李月月, 周文鹏, 路思倩, 等. 番茄斑驳花叶病毒在我国茄科作物上的发生及生物学特性. 中国农业科学, 2020, 53(3):539-550.
doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2020.03.007
[8] 王红梅, 王立光, 刘新星, 等. 兰州百合病毒RT-PCR检测技术建立及应用. 甘肃农业科技, 2021, 52(3):38-43.
[9] 王少立, 谭玮萍, 杨园园, 等. 山东省辣椒主要病毒种类的分子检测与鉴定. 中国农业科学, 2017, 50(14):2728-2738.
doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2017.14.009
[10] 孙琦, 张春庆. 马铃薯X病毒的RT-PCR检测. 园艺学报, 2003, 30(6):687-689.
[11] 张建云, 许文博, 刘升学, 等. 侵染加工番茄的BBWV2的分子鉴定及田间检测. 石河子大学学报(自然科学版), 2013, 31(6):675-679.
[12] 陈利达, 石延霞, 谢学文, 等. 我国不同地区番茄主要病毒病种类的分子检测与分析. 华北农学报, 2020, 35(1):185-193.
doi: 10.7668/hbnxb.20190230
[13] Niu Y B, Qing L, Yao M, et al. First report of Tobacco mosaic virus in Abutilon theophrasti in China. Plant Disease, 2009, 93(11):1221-1221.
[14] Ge B B, Liu G L, Wang H Q. First report of Tomato mosaic virus Infecting pepino in China. Plant Disease, 2012, 96(11):1704-1704.
[15] 柴阿丽, 陈利达, 许帅, 等. 新疆喀什辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒复合侵染的分子鉴定. 华北农学报, 2020, 35(增1):332-337.
[16] Fajarfika R, Hartono S, Sulandari S, et al. Molecular detection caused yellowing disease (Tomato chlorosis virus and Tomato infectious chlorosis virus) on tomatoes. Journal Perlindungan Tanaman Indonesia, 2015, 19(2):80-88.
[17] 涂丽琴, 吴淑华, 高丹娜, 等. 辽宁省番茄上番茄斑驳花叶病毒的分子鉴定. 江苏农业学报, 2020, 36(5):1126-1132.
[18] 田沂民, 俞禄珍, 易建平, 等. 进境番茄种子中番茄褐色皱纹果病毒的检测鉴定. 植物检疫, 2021, 35(4):35-38.
[19] 王晓敏, 李洪磊, 王林, 等. 银川番茄斑萎病毒的分子鉴定. 植物学报, 2021, 56(6):715-721.
doi: 10.11983/CBB21113
[20] 邓杰, 王炜哲, 杨璐嘉, 等. 宁夏设施番茄病毒病病原鉴定. 植物病理学报, 2020, 50(4):494-498.
[21] 鲁瑞芳, 李为民, 彭学贤. 植物病毒协生作用及其分子机理. 中国病毒学, 2001(3):2-8.
[22] Rochow W F, Ross A F. Virus multiplication in plants doubly infected by potato viruses X and Y. Virology, 1955, 1(1):10-27.
pmid: 13267974
[1] 赵鹏鹏, 李鲁华, 任明见, 安畅, 洪鼎立, 李欣, 徐如宏. 小麦GzCIPK7-5B基因的生物信息学及表达分析[J]. 作物杂志, 2023, (4): 77–84
[2] 郭燕, 刘志达, 康立茹, 包婷婷, 杨旭, 赵君, 张之为. 基于PDS基因的番茄VIGS高效沉默体系的优化[J]. 作物杂志, 2023, (2): 46–50
[3] 尹桂芳, 段迎, 杨晓琳, 蔡苏云, 王艳青, 卢文洁, 孙道旺, 贺润丽, 王莉花. 苦荞FtC4H基因克隆与生物信息学分析[J]. 作物杂志, 2022, (1): 77–83
[4] 王晓娟,赵圆峰,王娟玲,翟广谦,刘恩科,董春林,闫六英,张伟,姜春霞,张正. 不同覆盖方式对大棚滴灌番茄水分利用和经济效益的影响[J]. 作物杂志, 2018, (2): 103–107
[5] 卢艳丽,周洪友,张笑宇. 马铃薯茎尖脱毒方法优化及病毒检测[J]. 作物杂志, 2017, (1): 161–167
[6] 李钰,郑文寅,冯春,王荣富,李娟. 非生物逆境胁迫下普通小麦烟农19幼苗FeSOD基因表达分析[J]. 作物杂志, 2016, (4): 75–79
[7] 安顺伟, 周继华, 刘宝文, 程明, 杨海霞, 孙雪娇,. 痕量灌溉管不同埋深对番茄生长、产量和水分利用效率的影响[J]. 作物杂志, 2013, (3): 86–89
[8] 董旭, 张晓平, 赵开军, 王春连. 水稻CBB30Ⅰ抗白叶枯病相关基因的差异表达分析[J]. 作物杂志, 2012, (4): 20–25
[9] 孙方志, 王大庆, 刘慧民. 小黑杨APETALA1基因的克隆与花芽发育中的表达模式[J]. 作物杂志, 2012, (4): 34–40
[10] 陈兆贵, 施招婉, 陈静敏. 惠州马铃薯卷叶病毒病原分子鉴定及序列分析[J]. 作物杂志, 2012, (4): 45–48
[11] 张传伟, 宋述尧, 赵春波, 温涛, 孙凯. 番茄氮肥利用效率的基因型差异研究[J]. 作物杂志, 2011, (6): 42–45
[12] 白月, 才华, 栾凤侠, 等. 多重PCR结合DHPLC方法检测番茄中转基因成分[J]. 作物杂志, 2011, (2): 28–31
[13] 袁野, 吴凤芝, 周新刚, 等. 光氮互作对番茄光合特性的影响[J]. 作物杂志, 2011, (1): 13–16
[14] 赵琴, 鲁黎明. 白果强丰番茄高效再生体系的建立[J]. 作物杂志, 2010, (6): 42–45
[15] 张玉, 蒋欣梅, 于锡宏. 农杆菌介导的ICE1基因转化番茄的研究[J]. 作物杂志, 2010, (5): 51–55
Viewed
Full text


Abstract

Cited
  Shared   
  Discussed   
No Suggested Reading articles found!