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作物杂志,2014, 第1期: 54–58

• 遗传育种·种质资源·生物技术 • 上一篇    下一篇

大豆CYP78A5基因组织特异性启动子的克隆及表达分析

刘建伟1, 陈晓峰1, 刘广富2,郭宗端2, 李新柱3, 胡兆平3, 张亮3   

  1. 1. 维坊科技学院，261000，山东潍坊；2. 山东金正大生态工程股份有限公司，276700，山东临沭；3. 国家缓控释肥工程技术研究中心，276700，山东临沭
  • 收稿日期:2013-07-25 接受日期:2013-10-23 出版日期:2014-02-15 发布日期:2018-08-25

Cloning and Expression Analysis of CYP78A5,a Tissue-specific Promoter in Soybean

Liu Jianwei1,Chen Xiaofeng1, Liu Guangfu2,Guo Zongduan2,Li Xinzhu3,Hu Zhaoping3,Zhang liang3   

  1. 1. Weifang University of Science Technology,Weifang 261000,Shandong,China; 2. Kingenta Ecological Engineering Co.,Ltd.,Linshu 276700,Shandong,China; 3. National Engineering Technology Research Center For CRF,Linshu 276700,Shandong,China
  • Received:2013-07-25 Accepted:2013-10-23 Online:2014-02-15 Published:2018-08-25

PDF (PC)

133

摘要： 利用PCR技术从大豆中分离了CYP78A5基因的启动子，序列分析结果表明，扩增片段大小为1650bp，与已报道序列的相应区域同源性达99.21%。RT-PCR结果表明，CYP78A5在大豆不同组织中的表达存在差异，在未成熟种子中表达量较高，在茎（上胚轴与下胚轴）中有微弱表达，而在根和花组织中不表达。将该启动子片段与GUS报告基因融合，构建植物表达载体，并采用农杆菌介导法转化烟草。转基因烟草植株中GUS基因表达分析和染色结果表明，CYP78A5启动子可驱动GUS报告基因在转基因烟草茎中特异性表达，在根和叶器官中不表达。

关键词: 大豆, CYP78A5 启动子, 组织特异表达, GUS检测, 遗传转化

Abstract: The Promoter of CYP78A5 was isolated from soybean by PCR.The sequence alignment indicated that the amplified fragment(1650bp)shared high homology(99.21%) with the reported ones.RT-PCR results indicated that CYP78A5 highly expressed in immature seed and weekly expressed in stem of soybean,no expression was detected in roots and flowers.An expression vector containing this sequence fused with GUS was constructed for Agrobacterium-meditated transformation into tobacco.RT-PCR and histochemical staining of transgenic tobacco plants showed that GUS reporter gene was expressed strongly in the stem and didn't expressed in roots and leaves.It was drawn that CYP78A5 promoter displayed a tissue-specific expression pattern in tobacco.

Key words: Soybean, CYP78A5 promoter, Tissue specific expression, GUS assay, Tranformation

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