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作物杂志,2016, 第1期: 129–134 doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2016.01.024

• 生理生化·植物营养·栽培耕作 • 上一篇    下一篇

DABS-Cl柱前衍生-HPLC测定稻米中γ-氨基丁酸方法优化

邵金良,杨东顺,樊建麟,刘兴勇,杜丽娟,王丽,汪禄祥,刘宏程   

  1. 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所,650223,云南昆明
  • 收稿日期:2015-10-22 修回日期:2015-12-01 出版日期:2016-02-15 发布日期:2018-08-25
  • 通讯作者: 汪禄祥,刘宏程
  • 作者简介:邵金良,副研究员,研究方向为农产品质量安全与分析检测
  • 基金资助:
    农业部2013年行业标准制定和修订项目《稻米中γ-氨基丁酸的测定》;云南省科技惠民专项（农业）重点项目(2014RA054);南省科技创新平台建设计划（公共科技服务）项目(2014DA001)

Method Optimization of Measuring γ-Aminobutyric Acid Contents in Rice by HPLC Coupled with Dabsyl Chloride Precolumn Derivatization

Shao Jinliang,Yang Dongshun,Fan Jianlin,Liu Xingyong,Du Lijuan,Wang Li,Wang Luxiang,Liu Hongcheng   

  1. Institute of Agriculture Quality Standards & Testing Technique,Yunnan Academy of Agricultural Sciences,Kunming 650223,Yunnan,China
  • Received:2015-10-22 Revised:2015-12-01 Online:2016-02-15 Published:2018-08-25
  • Contact: Luxiang Wang,Hongcheng Liu

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摘要：

建立4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯柱前衍生-高效液相色谱测定稻米γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。样品采用80%的乙醇溶液提取后,1.0mL样液依次加入0.20mL碳酸氢钠和0.40mL DABS-Cl在70℃下衍生20min,利用C18色谱柱,乙腈-三水合乙酸钠溶液作为流动相在436nm波长下测定GABA含量。结果显示：GABA在糙米和精米的添加回收率大于87.60%,相对标准偏差小于9.07%;GABA在1.0~100.0mg/L内具有良好的线性关系,相关系数为r=0.9995（n=3）。用本方法测定了14种糙米和精米样品的GABA,其含量为6.38~108.7mg/kg,湖南精米和糙米中的GABA含量最高。

关键词: 4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯, 柱前衍生, 高效液相色谱法, γ-氨基丁酸;, 稻米

Abstract:

A method of measuring γ-aminobutyric acid (GABA) content in rice was established by high performance liquid chromatography coupled with dabsyl chloride pre-column derivatization. Using 80% ethanol as extracting solvent, and then 1.0mL extracted fluid pre-column derivatization with 0.20mL sodium bicarbonate, 0.40mL dabsyl chloride at 70℃ and 20min, chromatographic analysis was performed on C18 column eluted with an acetonitrile-sodium acetate trihydrate and ultraviolet detector at 436nm. The results showed that the fortified recovery of GABA was more than 87.60% and the standard deviation was less than 9.07%. A good linear range from 1.0mg/L to100.0mg/L concentration of GABA with correlation of 0.9995 (n=3) was obtained. GABA content in 14 rice and brown rice (6.38-108.7mg/kg) were determined by the method, and the content of GABA in Hunan rice was the highest.

Key words: DABS-Cl, Pre-column derivatization, HPLC, GABA, Rice

图 1

碳酸氢钠溶液用量对GABA衍生物峰面积的影响"

图 2

DABS-Cl衍生溶液用量对GABA衍生物峰面积的影响"

图 3

衍生温度对GABA衍生物峰面积的影响"

图 4

衍生时间对GABA衍生物峰面积的影响"

图 5

GABA衍生物稳定性"

图 6

不同流动相对GABA的洗脱能力"

图 7

不同流速对GABA保留时间的影响"

图 8

GABA的最大吸收波长"

表1

GABA的加标回收和精密度"

添加水平（mg/kg）
Adding level		 精米Rice 添加水平（mg/kg）
Adding level		 糙米Brown rice
回收率（%）Recovery rate RSD（%） 回收率(%)Recovery rate RSD(%)
5 87.60 9.07 25 96.56 6.32
10 94.13 2.32 50 106.10 2.81
25 104.50 3.32 100 92.54 1.83

表 2

样品中GABA的含量分析"

样品来源Samples from GABA
精米Rice 糙米
Brown rice
中国云南（红河）Yunnan(Honghe)of China 6.38 34.5
中国云南（玉溪）Yunnan(Yuxi) of China 19.40 50.6
中国四川Sichuan of China 20.90 58.2
中国江苏Jiangsu of China 22.30 62.1
中国安徽Anhui of China 23.40 71.5
中国湖南Hunan of China 25.40 108.7
泰国Thailand 24.50 96.9
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