检索
E-mail
RSS
高级检索 图表检索

当期目录 我要投稿 过刊浏览
高级检索 图表检索

作物杂志,2016, 第5期: 160–166 doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2016.05.028

• 植物保护 • 上一篇    下一篇

两种配方快速分离纯化马铃薯致病疫霉菌株效果的比较

王蓓蓓1,蒋继志1,李颖1,万安琪1,桂春爽1,黄英菊1,杨志辉2,朱杰华2   

  1. 1 河北大学生命科学学院,071002,河北保定
    2 河北农业大学植物保护学院,071001,河北保定
  • 收稿日期:2016-06-28 修回日期:2016-08-24 出版日期:2016-10-15 发布日期:2018-08-26
  • 通讯作者: 蒋继志
  • 作者简介:王蓓蓓,在读硕士,专业方向为生物化学与分子生物学
  • 基金资助:
    公益性行业（农业）科研专项(201303018)

Comparison of Isolation Efficiency of Phytophthora infestans with Two Antibiotics Formulas

Wang Beibei1,Jiang Jizhi1,Li Ying1,Wan Anqi1,Gui Chunshuang1,Huang Yingju1,Yang Zhihui2,Zhu Jiehua2   

  1. 1 College of Life Sciences,Hebei University,Baoding 071002,Hebei,China
    2 College of Plant Protection,Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,Hebei,China
  • Received:2016-06-28 Revised:2016-08-24 Online:2016-10-15 Published:2018-08-26
  • Contact: Jizhi Jiang

RichHTML

3

PDF (PC)

130

摘要：

为了能在田间快速分离马铃薯致病疫霉菌株,同时能将实验室内被污染的致病疫霉菌株有效地纯化出来,对在黑麦培养基中添加制霉菌素配方和红药水配方分离致病疫霉菌株的效果进行了比较。结果显示,从田间马铃薯病叶上直接分离致病疫霉菌株时,制霉菌素配方的纯化率高于红药水配方,分别为74%和52%;在分离实验室受杂菌污染的致病疫霉菌株时,红药水配方的纯化率高于制霉菌素配方,分别为78%和36%;两种配方对致病疫霉菌株后期生长均有一定的抑制作用,其中制霉菌素配方的抑制作用明显强于红药水配方,两者的生长抑制率分别为65.79％和18.63％;然而,两种配方对致病疫霉菌株后期产生孢子囊的数量、孢子囊直接萌发和游动孢子释放、致病疫霉菌丝体的可溶性蛋白含量都没有显著影响,同时在3个感病马铃薯品种上的致病性也均没有明显影响。田间病叶上采集的致病疫霉菌株在制霉菌素配方的黑麦培养基冻存管中20℃最长可保存16个月,表明制霉菌素配方更适合于田间快速分离纯化致病疫霉菌株,而红药水配方更适合于分离纯化实验室内被污染的致病疫霉菌株。

关键词: 致病疫霉, 马铃薯, 制霉菌素, 红药水, 分离纯化

Abstract:

The isolation of Phytophthora infestans strains from diseased leaves of potato in field and from the media of contaminating microorganism in lab is difficult with traditional method. The purpose of this experiment is to compare the isolation efficiency of P. infestans by Nystatin formula and Merbromin formula in rye culture medium. The results showed that purification rates of Nystatin formula and Merbromin formula was 74% and 52% from diseased potato leaves in field, respectively, but that were 36% and 78% from the media of contaminating microorganism in lab, respectively. The two formulas had some inhibition on mycelia growth of P. infestans and Merbromin formula displayed stronger inhibition in comparison with Nystatin formula, the inhibition rates were 65.79% and 18.63%, respectively. However, the two formulations had no significant effect on spoangia formation, sporangia direct germination, and zoospores release, as well as the mycelia protein content of P.infestans. In addition, both Nystatin formula and Merbromin formula did not affect the pathogenicity of P. infestans on potato tuber slices of tested three varieties. The strains isolated from diseased potato leaves in field could be kept for 16 months in frozen storage tube of rye culture medium adding Nystatin formula. These findings indicate that Nystatin formula is suitable for isolation of P. infestans strains from field and Merbromin formula for that from lab.

Key words: Phytophthora infestans, Potato, Nystatin, Merbromin, Isolation and purification

图1

添加两种抗生素配方的黑麦培养基小管及其田间对致病疫霉菌株的直接分离 A：制霉菌素配方Nystatin formula;B：红药水配方Merbromin formula;The same below"

图2

添加两种抗生素配方黑麦培养基在田间直接分离纯化致病疫霉菌株的效果 C：对照Control.The same below"

表1

两种抗生素配方在田间直接分离致病疫霉菌落直径比较"

处理Treatment 从冻存管转接致病疫霉后的培养时间Incubation time of P.infestansstrains from frozen storage tube (d)
4 5 6 7 8
制霉菌素配方Nystatin formula 44.7a/3.7a 56.3a/11.0a 69.0a/18.3a 79.3a/22.0a N/M
红药水配方Merbromin formula 25.0b/122.7b 29.3b/143.7b 35.3b/158.0b 37.0b/161.7b N/M
对照Control 42.7a/126.0b N/147.7b N/M N/M N/M

表2

两种抗生素配方分离实验室受杂菌污染致病疫霉菌落直径比较"

处理Treatment 从污染平板上转接致病疫霉后的培养时间(d)
Incubation time of P.infestans strains from contaminating microorganism
3 4 5 6 7 8 9
制霉菌素配方Nystatin formula 9.6b/3.7b 14.1b/11.0b 19.3b/18.3b 24.5b/22.0b 36.7b/23.5b N/M N/M
红药水配方Merbromin formula 23.4a/122.7a 34.2a/143.7a 42.6a/158.0a 53.6a/161.7a 61.5a/172.2a 68.3a/178.4a N/M
对照Control 26.6a/126.0a 31.2/147.7a N/M N/M N/M N/M N/M

图3

两种抗生素配方对致病疫霉后期生长的影响"

表3

两种抗生素配方对致病疫霉产孢量的影响"

处理Treatment 每视野中的孢子囊个数Number of sporangia per field of vision 平均值Mean
制霉菌素配方Nystatin formula 31 23 38 24 28 24 20 14 15 28 24.5
红药水配方Merbromin formula 19 20 18 23 37 14 13 28 30 36 23.8
对照Control 26 38 27 11 30 35 15 32 23 42 27.9

图4

两种抗生素配方对致病疫霉致病性的影响"

表4

两种抗生素对致病疫霉菌株孢子囊萌发和游动孢子释放的影响"

处理
Treatment		 游动孢子释放率
Zoospores release rate		 抑制率
Suppression rate		 孢子囊直接萌发率
Sporangia direct germination rate		 抑制率
Suppression rate
制霉菌素配方Nystatin formula 48.75a 3.79 45.73a 12.06
红药水配方Merbromin formula 46.58a 8.07 46.39a 10.79
对照Control 50.67 - 52.00 -

图5

蛋白质含量标准曲线"

图6

不同处理对致病疫霉菌丝可溶性蛋白的影响"

[1] Chmielarz M, Sobkowiak S , et al. Diversity of Phytophthora infestans from Poland. Plant Pathology, 2014,63(1):203-211.
doi: 10.1111/ppa.12076
[2] Arora R K, Sharma S, Singh B P . Late blight disease of potato and its management. Potato Journal, 2014,41(1):16-40.
[3] Cespedes M C, Cardenas M E, Vargas A M , et al. Physiological and molecular characterization of Phytophthora infestans isolates from the Central Colombian Andean Region. Revista Iberoamericana de Micología, 2013,30(2):81-87.
doi: 10.1016/j.riam.2012.09.005
[4] Blandon-Diaz J U, Widmark A K, Hannukkala A , et al. Phenotypic variation within a clonal lineage of Phytophthora infestans infecting both tomato and potato in Nicaragua. Phytopathology, 2012,102(3):323-330.
doi: 10.1094/PHYTO-02-11-0033
[5] 桂春爽 . 北方四省致病疫霉致病型及拮抗菌复合发酵抑菌作用的研究. 保定:河北大学, 2010.
[6] 黄英菊 . 北方五省区致病疫霉生理小种分布及3种拮抗菌的比较研究. 保定:河北大学, 2015.
[7] 刘红梅, 孟晓营, 刘兆明 , 等. A5295激发子诱导马铃薯抗晚疫病条件的优化. 作物杂志, 2015(1):67-71.
doi: 10.16035/j.issn.1001-7283.2015.01.014
[8] 蒋继志, 孙琳琳, 郭会婧 , 等. 几种微生物提取物诱导马铃薯抗晚疫病及机理的初步研究. 植物病理学报, 2010,40(2):173-179.
[9] 赵偲 . 北方五省区致病疫霉抗药性监测及拮抗细菌ST-1的初步探索. 保定:河北大学, 2015.
[10] 宋伯符, 谢开云 . CIP的全球晚疫病防治倡议与我国的参与. 马铃薯杂志, 1997,11(1):51-55.
[11] 李惠霞, 刘永刚, 王蒂 , 等. 马铃薯晚疫病菌培养条件的研究. 中国马铃薯, 2007,21(4):203-205.
[12] 王美琴, 田亚丽 . 番茄晚疫病菌的分离及对杀菌剂的毒力测定. 农业技术与装备, 2011(3):67-68,70.
[13] 包海银 . 马铃薯晚疫病菌的分离纯化和单孢分离[EB/OL]. 北京:中国科技论文在线 [2006-06-30]..
[14] 朱杰华, 张志铭, 杨志辉 . 马铃薯晚疫病菌的常规研究方法. 河北农业大学学报, 2001,24(2):112-114.
[15] 李新新 . 马铃薯晚疫病菌的长期保存与特异性SCAR标记的开发. 哈尔滨:东北农业大学, 2012.
[16] 张珏锋, 何月平, 陈建明 . 制霉菌素对褐飞虱取食行为、营养及共生菌数量的影响. 植物保护学报, 2015,42(2):264-270.
[1] 宿飞飞 张静华 李 勇 刘尚武 刘振宇 王绍鹏 万书明 陈 曦 高云飞 胡林双 吕典秋. 不同灌溉方式对两个马铃薯品种#br# 生理特性和水分利用效率的影响[J]. 作物杂志, 2018, (5): 97–103
[2] 柴莹,徐永清,付瑶,李秀钰,贺付蒙,韩英琦,冯哲,李凤兰. 马铃薯干腐病病原镰孢菌体内产细胞壁降解酶特性研究[J]. 作物杂志, 2018, (4): 154–160
[3] 张晓勇,杨友联,李树江,熊荣川,向红. 外源激素对低温胁迫下脱毒马铃薯扦插苗早衰的影响[J]. 作物杂志, 2018, (4): 95–101
[4] 梁淑敏,王颖,潘哲超,张磊,徐宁生,李燕山,杨琼芬,李先平,白建明,姚春光,卢丽丽,隋启君. 不同栽培模式的土壤水热效应对马铃薯产量及结薯规律的影响[J]. 作物杂志, 2018, (3): 90–96
[5] 叶怡然,达布希拉图,沙本才,王文祥,叶宏达,耿世娴,成京晋,海梅荣. 不同肥料对冬马铃薯光合特性的影响[J]. 作物杂志, 2018, (3): 135–140
[6] 田荟遥,蒋继志,李成斌,申芬,侯宁. 中国东北地区马铃薯致病疫霉遗传多样性分析[J]. 作物杂志, 2018, (3): 168–173
[7] 石晓华,杨海鹰,康文钦,秦永林,樊明寿,贾立国. 不同施氮量对马铃薯-小麦轮作体系产量及土壤氮素平衡的影响[J]. 作物杂志, 2018, (2): 108–116
[8] 崔勇. 马铃薯连作造成的影响及连作障碍防控技术[J]. 作物杂志, 2018, (2): 87–92
[9] 梁淑敏,张磊,和生鼎,杨群擎,李燕山,和平根,王绍林,王颖,杨琼芬,隋启君. 滇西北马铃薯不同栽培模式下产量及经济效益分析[J]. 作物杂志, 2017, (6): 79–83
[10] 叶宏达,达布希拉图,沙本才,王文祥,刘佳,叶怡然,海梅荣. 海拔梯度对马铃薯光合特性和荧光特性的影响[J]. 作物杂志, 2017, (5): 93–99
[11] 赵媛媛,张丽莉,石瑛. 马铃薯抗旱种质资源的筛选[J]. 作物杂志, 2017, (4): 72–77
[12] 王游游,蒋继志,田荟遥,李明,王雪宁,吴艳清,孙涵. 拮抗放线菌Sy11菌株感应的致病疫霉信号分子初步研究[J]. 作物杂志, 2017, (4): 150–154
[13] 黄越,李帅兵,石瑛. 马铃薯不同品种块茎矿质营养品质的差异[J]. 作物杂志, 2017, (4): 33–37
[14] 罗赛男,汤睿,张文,王艳兰,王卫红. 五个马铃薯品种在湖南冬闲田种植的适应性[J]. 作物杂志, 2017, (3): 25–28
[15] 金萌,魏红,杨云波,吕乐慧,张慧,白妍,孙佳亿. 阴山北麓干旱地区水分对马铃薯产量及养分吸收的影响[J]. 作物杂志, 2017, (3): 85–90
Viewed
Full text


Abstract

Cited
  Shared   
  Discussed   
[1] 赵广才,常旭虹,王德梅,陶志强,王艳杰,杨玉双,朱英杰. 小麦生产概况及其发展[J]. 作物杂志, 2018, (4): 1 –7 .
[2] 黄文辉, 王会, 梅德圣. 农作物抗倒性研究进展[J]. 作物杂志, 2018, (4): 13 –19 .
[3] 柏文恋,郑毅,肖靖秀. 豆科禾本科间作促进磷高效吸收利用的地下部生物学机制研究进展[J]. 作物杂志, 2018, (4): 20 –27 .
[4] 李程勋,李爱萍,徐晓俞,郑开斌. 浅谈木豆的抗逆机制及在福建的应用前景[J]. 作物杂志, 2018, (4): 28 –31 .
[5] 温辉芹,程天灵,裴自友,李雪,张立生,朱玫. 山西省近年审定小麦品种的综合性状分析[J]. 作物杂志, 2018, (4): 32 –36 .
[6] 梁海燕, 李海, 林凤仙, 张翔宇, 张知, 宋晓强. 不同糜子品种抗倒伏性田间鉴定及抗倒评价指标的筛选分析[J]. 作物杂志, 2018, (4): 37 –41 .
[7] 魏萌涵, 解慧芳, 邢璐, 宋慧, 王淑君, 王素英, 刘海萍, 付楠, 刘金荣. 华北地区谷子产量与农艺性状的综合评价分析[J]. 作物杂志, 2018, (4): 42 –47 .
[8] 何中国,朱统国,李玉发,王佰众,牛海龙,刘红欣,李伟堂,牟书靓. 吉林省花生育种现状及发展方向[J]. 作物杂志, 2018, (4): 8 –12 .
[9] 梁晓宇, 林春雨, 马淑梅, 王洋. 水稻耐盐碱胁迫优异等位变异的发掘[J]. 作物杂志, 2018, (4): 48 –52 .
[10] 罗海斌, 蒋胜理, 黄诚梅, 曹辉庆, 邓智年, 吴凯朝, 徐林, 陆珍, 魏源文. 甘蔗ScHAK10基因克隆及表达分析[J]. 作物杂志, 2018, (4): 53 –61 .